nanodrop one微量分光光度計的使用方法

美國nanodrop one光度計使用

Nanodrop是實(shí)驗室中常見(jiàn)的分光光度計。與傳統需要比色皿的分光光度計相比，Nanodrop所需樣品的體積大大減少，只需要2 μL，同時(shí)也大大降低了實(shí)驗準備以及清洗的時(shí)間。這些優(yōu)勢使得科研人員能夠在一分鐘內檢測多個(gè)樣品。當然如果你有更多的樣品，還嫌效率不夠高，你可以選擇應用Nanodrop 8000系統，它能夠同時(shí)檢測8個(gè)樣品。

Nanodrop能夠在包括紫外及可見(jiàn)光區域在內的光譜范圍內檢測樣品的吸光度信號。在實(shí)驗開(kāi)始前，需要在儀器的軟件內設置檢測樣品的種類(lèi)，包括蛋白質(zhì)，DNA, RNA等。根據吸光度,能夠計算樣品的濃度。DNA及RNA 在260 nm處有吸收度，蛋白質(zhì)在280 nm處有吸收峰值。濃度與吸光度的對應關(guān)系見(jiàn)下表。當然表中濃度與吸光度對應關(guān)系成立的前提是樣品必須具有很高的純度。樣品純度可以通過(guò)A260/280判定，其臨界值可參考下表。 大家可能注意到，RNA的A260/280比值要比DNA的值高一些，這是因為堿基U的A260/280的比值要比堿基T的A260/280比值更高。

對Nanodrop檢測結果產(chǎn)生直接影響的因素就是樣品的純度。A260/280是檢測樣品純度的一個(gè)指標，但這個(gè)參數只衡量了蛋白質(zhì)與核酸之間相互污染的情況。沒(méi)有考慮DNA與RNA之間彼此污染以及其他物質(zhì)污染的情況，比如苯酚在270 nm附近具有較大的吸光值。

因此在利用Nanodrop檢測核酸濃度的時(shí)候，除了A260/280外，A260/230也是檢測樣品純度的一個(gè)指標，高純度DNA和RNA的兩個(gè)臨界值同樣是1.8以及2.0。A260/230在2.0-2.2之間是合理的數值。對于純的核酸，A260/230的值通常大于A(yíng)260/280的值。核酸提取過(guò)程中殘留的有機物通常會(huì )對檢測結果產(chǎn)生影響。如果檢測結果顯示230nm處具有很大的吸光值，樣品很有可能被EDTA，碳水化合物或者硫氰酸胍等物質(zhì)污染了。

Nanodrop的檢測范圍。對于核酸來(lái)說(shuō)，Nanodrop的檢測濃度范圍在2ng-15μg/μL之間。所以當樣品的濃度很低時(shí)，比如從單個(gè)或少量細胞中提取的DNA或RNA，利用Nanodrop來(lái)測量濃度可能就不適合了。這時(shí)需要考慮其他的核酸定量方法比如熒光染料的方法。

此款符合人體工程學(xué)的獨立式分光光度計具有高分辨率和觸摸屏界面設計，使您離研究目標更進(jìn)一步。 強大的自動(dòng)調 節光程技術(shù)有助于準確測量濃縮樣品而無(wú)需稀釋。

Acclaro 樣品智能技術(shù)

Acclaro 技術(shù)可以在提供準確的定量測定的同時(shí)，增強用戶(hù)對樣品質(zhì)量的了解。 對污染物的早期鑒別能夠避免下游應用的失敗，從而節省故障排除的時(shí)間。

在數秒內驗證樣品結果 - 鑒別樣品污染物并獲得矯正的濃度結果。

通過(guò)警報獲取信息 – 通過(guò)提供相應的技術(shù)支持和解決問(wèn)題向導，從而獲得樣品質(zhì)量的即時(shí)反饋。

依靠準確結果——采用嵌入式傳感器和數字影像分析技術(shù)，確保測量完整性。

NanoDrop One/NanoDrop OneC  特點(diǎn)

同時(shí)包含基座和比色皿檢測模塊，以擴展實(shí)驗靈活性和擴大動(dòng)態(tài)范圍。

測量稀釋樣品，執行動(dòng)力學(xué)實(shí)驗并獲取細菌培養物的光密度測量結果。

比色皿檢測模塊包括溫度控制和攪拌區域。